1.        打开电脑主机电源。

2.        打开F4500主机电源。间隔10秒后，按下氘灯开关按键（不得超过5秒），当黄灯亮起不熄灭时，打开主板电源。

3.        点击FL solutions图标，打开仪器工作程序窗口。

4.        将待测溶液倒入荧光比色皿，用柔软的滤纸（最好为擦镜纸）拭去荧光比色皿外侧溶液，打开仪器盖，将荧光比色皿放入仪器中的专用位置，盖好盖子。

5.        点击“方法”图标。在打开的框图中，点击“一般” 图标，选择“波长扫描”方式；点击“仪器”图标，选择扫描方式为“发射”，固定激发波长为某一整数值X，发射扫描开始波长为“X + 20”nm，发射扫描结束波长为“2X－20”nm，但发射扫描结束波长最大不超过900nm。

6.        点击“测量”图标，开始进行发射光谱扫描。仪器结束扫描后自动给出相应的测量参数和最大发射波长及对应的荧光强度。

7.        点击“方法”图标。在打开的框图中，点击“仪器”图标，选择扫描方式为“激发”，发射波长选择刚才所得的最大发射波长数值Y，激发扫描开始波长为“1/2Y + 20”nm，激发扫描结束波长为“Y－20”nm。

8.        点击“测量”图标，开始进行激发光谱扫描。仪器结束扫描后自动给出相应的测量参数和最大激发波长及对应的荧光强度。

9.        将激发波长设为“八、”确定的数值。重复“五、”至“八、”的步骤。直至获得的激发波长和发射波长的数值不再明显改变为止。

10.    点击“方法”图标，在打开的框图中，点击“一般” 图标，选择“光度计”方式，选择“使用样品表”；点击“定量”图标，“定量”为波长，“校正曲线”为1级，“浓度”为mg/L，“小数点后位数”为1；点击“仪器”图标，在Ex 和Em项填写获得的最佳激发波长和发射波长数值，“重复”为3，“波长”为两者波长固定；点击“标准”图标，“样品数”为6，栏中分别输入相应溶液的浓度。点击“确定”。

11.    点击“样品”图标，选择测定的样品数目，点击“确定”。

12.    将待测溶液装入荧光比色皿，放入仪器荧光架。点击“测量”，按提示逐步操作。记录测量样品溶液的荧光强度、浓度、回归方程、相关系数及样品溶液浓度。计算含量。

13.    工作结束后，清洗荧光比色皿，关闭仪器工作程序窗口。

14.    顺序关闭主板电源、主机电源。