1、试剂配制及保存 
         缓冲剂               20包         每包加1000mL蒸馏水或纯净水溶解         常温存放。 
         显色剂                2瓶          每瓶加25mL缓冲液溶解                              4℃冰箱保存，每份加50μL。 
         底    物                5瓶          每瓶加10mL蒸馏水或纯净水溶解              4℃冰箱保存，每份加50μL。
         胆碱酯酶            5瓶          不用配制，直接取用                                     4℃冰箱保存，每份加50μL。 
         酶活力         空白对照3分钟吸光度变化值(ΔΑ₀)在0.4-0.8之间。

2、样品提取 
        取2g果蔬样品（块茎类取4g）剪成1cm左右见方碎片，放入小烧杯（或取样瓶）中；加入20mL缓冲液，振荡1～2min，倒出提取液，静置2min待测。

3、测试 
        对照测试：于专用反应瓶中加入3mL缓冲液，再分别加入50μL显色剂和酶液，混匀，37℃下放置30min后加入50μL底物，摇匀并立即倒入比色杯中，放入测试通道，按仪器“对照”键测试3min的吸光度变值ΔΑ₀。 
        样品测试：于专用反应瓶中加入3mL待测样品液，再分别加入50μL显色剂和酶液，混匀，37℃下放置30 min后加入50μL底物，摇匀并立即倒入比色杯中，放入测试通道，按仪器“样品”键，测试3min的吸光度变化值ΔΑt。
结果判定： 
        ◇ 以分光光度计测试时，按以下表达式计算出抑制率： 抑制率(%)=[(ΔΑ₀－ΔΑ_t)/ΔΑ₀]×100
        ◇ 以农残检测仪检测时其抑制率一般可自动计算。若样品抑制率≥70%，表示被测果蔬农残超标，为阳性结果。阳性结果的样品需做2次以上重复检测，多次检测仍呈阳性需用气相色谱等仪器做进一步确认。 
操作提示：
        在加底物的环节中，可预先将底物加入比色杯，待静置时间一到，马上将反应瓶中的反应液倒入已经加有底物的比色杯，并迅速放入测试通道进行测试。这样可以减少同时检测多个样品时因加底物时间过长而造成的误差。

4、注意事项 
        酶活性要求：本试剂盒中酶试剂正常活性ΔΑ0=0.4～ 0.8，符合NY/T 448-2001方法的要求。 
        保存：试剂盒应保存4℃冰箱，保质期12个月。 
        使用：任何试剂使用时，用一瓶打开一瓶，用完后才使用新的，防止变质。 
        器具专用原则：任何用于移液的器具和容器都应各自贴上标签，单独使用，以免交叉污染。 
        试剂只出不入原则：测试时，从任何试剂瓶吸出的试剂，禁止再次注射回试剂瓶。 
        环境温度对测试的影响：当环境温度过低时（一般低于20℃）,测试时需作必要保温措施